يمثل التطور المستمر لسلالات الإنفلونزا المقاومة للأدوية مصدر قلق عالمي. وقد تساهم ابتكارات طرق العلاج الجديدة من خلال استراتيجيات فحص الأدوية ودراسة النشاط المضاد للفيروسات للمركبات الطبيعية النشطة بيولوجيًا في معالجة هذه المشكلة. في هذا البحث، قمنا بفحص فعالية بعض القلويدات النيتروجينية النشطة بيولوجيًا من نوع الإندول وβ-كاربولين ضد نوعين مختلفين من فيروس الإنفلونزا A (IAV) بمدى مضيف مختلف: الإنفلونزا الموسمية A/Egypt/NRC098/2019(H1N1) والإنفلونزا الطيور A/chicken/Egypt/N12640A/2016(H5N1). تم أولاً تقييم جميع المركبات لمعرفة تركيزها النصفي السمي للخلايا (CC50) في خلايا MDCK وتركيزها النصفي المثبط (IC50) ضد فيروس الإنفلونزا A/H5N1. بشكل مثير للاهتمام، أظهرت مركبات Strychnine sulfate، Harmalol، Harmane، وHarmaline نشاطًا قويًا ضد H5N1 بقيم IC50 تبلغ 11.85، 0.02، 0.023، و3.42 ميكروغرام/مل، على التوالي، مقارنةً بالأدوية المرجعية zanamivir وamantadine (IC50 = 0.079 و17.59 ميكروغرام/مل، على التوالي). كما تم تأكيد فعالية المركبات النباتية المحددة مسبقًا ضد فيروس الإنفلونزا A/H1N1، حيث أظهرت نشاطًا مضادًا قويًا لـ H1N1 مقارنة بالأدوية المرجعية. بناءً على قيم مؤشر الانتقائية (SI)، تم تقييم المركبات الواعدة للغاية من حيث الفعالية المضادة للفيروسات عبر اختبار تقليل اللويحات (Plaque Reduction Assay)، وأظهرت نتائجها مستويات عالية من تثبيط الفيروس عند تركيزات غير سامة. من خلال دراسة آليات العمل المضاد للفيروسات، تبين أن Harmane وHarmalol يمكنهما كبح العدوى الفيروسية بشكل رئيسي عبر التدخل في تكرار فيروس الإنفلونزا A/H5N1، في حين أظهر Harmaline تأثيرًا قاتلًا للفيروس ضد الإنفلونزا A/H5N1. أما Strychnine sulfate، فقد أوضح فعاليته المضادة للإنفلونزا من خلال التدخل في امتصاص الفيروس داخل خلايا MDCK. وبشكل متسق، أظهرت الدراسات الكيميائية المعلوماتية أن جميع المركبات النباتية المدروسة شكلت روابط هيدروجينية مع الأخدود الببتيدي الأساسي عبر NH لمجموعة الإندول. من بين القلويدات النشطة، أظهر Harmalol أفضل مقاييس الذوبان الدهني بما في ذلك كفاءة الرابط (LE) وكفاءة الرابط الدهنية (LLE) لكلا الفيروسين. شكل المركبات وقدرتها على المشاركة في تكوين الروابط الهيدروجينية يعتبران أمرًا بالغ الأهمية.