العلاج الكيميائي لا يزال الأساس في علاج مرضى سرطان الثدي الثلاثي السلبية (TNBC). ومع ذلك، يظهر فقط 20٪ من مرضى TNBC استجابة مرضية كاملة (pCR) بعد العلاج الكيميائي المساعد. يُعتبر 5-فلورويوراسيل (5-FU) حجر الزاوية المستقر في جميع البروتوكولات العلاجية الكيميائية الموصى بها لمرضى TNBC. ومع ذلك، فإن معدل مقاومة مرضى TNBC الكيميائية الفطرية أو المكتسبة لـ 5-FU في تزايد حاد. تهدف هذه الدراسة إلى فك آلية مقاومة 5-FU في خط الخلايا العدوانية TNBC، خلايا MDA-MB-231، لاستكشاف دور المثبطات الورمية الصغيرة (miRNAs)، مثل miR-1275، و miR-615-5p، و Let-7i، في تخفيف مقاومة 5-FU في TNBC، وفي النهاية تقديم نهج علاجي ترجمّي لتوصيل 5-FU والأوليغونوكليوتيدات الخاصة بالـ miRNA باستخدام الجسيمات النانوية المعتمدة على الكيتوسان (CsNPs). في هذا السياق، تم التحقيق في صلاحية الخلايا وتكاثرها باستخدام اختباري MTT و BrdU على التوالي. وقد وُجد أن 5-FU يحفز مسارات JAK/STAT و PI3K/Akt/mTOR في خلايا MDA-MB-231 مع قمع ملوث لمُنظماتها العلوية من miR-1275، و miR-615-5p، و Let-7i. علاوة على ذلك، تم اختيار ودراسة الجسيمات النانوية CsNPs المعدة باستخدام طريقة الجيلاتين الأيوني كناقلات نانوية لـ 5-FU و مزيج من أوليغونوكليوتيدات الـ miRNA المستهدفة لـ TNBC. تم تحديد متوسط أحجام الجسيمات، والشحنات السطحية، والأشكال الخاصة بـ CsNPs المختلفة باستخدام تشتت الضوء الديناميكي (DLS) والمجهر الإلكتروني الناقل (TEM) على التوالي. بالإضافة إلى ذلك، تم تقييم كفاءة التغطية (EE%)، وسعة تحميل الدواء (DLC%)، وطريقة الإطلاق عند قيمتي pH مختلفتين. في الختام، أظهرت جسيمات CsNPs الجديدة التي تم تحميلها مع 5-FU ومزيج من ثلاث أوليغونوكليوتيدات miRNA نشاطًا تآزريًا وقمعًا ملحوظًا في صلاحية الخلايا وتكاثرها في خلايا TNBC من خلال تخفيف مقاومة الكيمياء لـ 5-FU.